鸡Prnp基因原核表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L^-1,16 ℃,220 r·min^-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。     

毛竹混交技术研究

结合毛竹抚育,在毛竹林内保留不同密度、不同树种的林木,观测混交对毛竹产量的影响。结果表明,毛竹与枫香、栎类混交,混交密度为40~50株/hm~2时能明显促进毛竹生长,而杉木、马尾松对毛竹生长有一定的抑制作用。     

N、P、K对澳洲茶树萌芽林枝叶产量和产油量的影响

采用"311-A"最优混合设计,研究了N、P、K对澳洲茶树[Melaleuca alternifolia(MaidenBetche) Cheel]萌芽林侧枝质量、枝叶总质量、产油量和含油率的影响。结果表明,合适的N、P、K配比有利于提高澳洲茶树萌芽林的侧枝质量、枝叶总质量和产油量。N、P、K的用量分别为99.1、33.9、97.4 g/株时,相应的侧枝质量为3.22 kg/株、枝叶总质量为4.77kg/株、产油量0.050 2 kg/株、含油率1.70%。澳洲茶树初代萌芽林最佳的N、P、K施肥配比为1∶0. 34∶0.98。     

湖北省主栽油茶品种苗期抗寒性评价

为给湖北省油茶良种的选育、引种及栽培提供参考依据,以阳新米茶202、阳新桐茶208、长林4号、长林18号、长林23号、长林40号、谷城大红果8号共7个油茶品种的2年生嫁接苗为试验材料,研究了4 ℃和-4 ℃的低温对其形态与生理的影响情况,并分别采用聚类分析和隶属函数分析法对7个品种的抗寒性进行了评价。结果显示:4 ℃的低温对7个品种植株中下部的成熟叶片均未造成明显伤害,而对其嫩叶与嫩茎均造成了不同程度的伤害;-4 ℃的低温对7个品种植株的嫩叶、嫩茎和成熟叶均造成了明显的伤害。低温胁迫显著降低了7个品种植株叶片各气体交换参数(P_n、G_s、T_r)值,提高了其叶片中的丙二醛含量、相对电导率和脯氨酸含量。7个品种对低温胁迫的响应存在显著差异。聚类分析和隶属函数分析结果均表明:阳新米茶202、阳新桐茶208和长林23号均为较能抗寒的品种,而长林4号和长林40号均为不抗寒品种。     

谷子MDH基因非生物逆境响应特性研究

为揭示谷子MDH基因对逆境胁迫的响应,本研究通过序列比对得到2个谷子苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase, MDH)基因SiMDH1、SiMDH2,并对SiMDH1和SiMDH2的编码蛋白特征、基因结构、功能、进化等性状进行了系统的分析和预测,用荧光实时定量PCR(qPCR)检测了SiMDH1和SiMDH2在苗期不同逆境及关键生育期干旱胁迫和不同光照强度下的表达。蛋白特征参数和序列分析表明,SiMDH1和SiMDH2蛋白特征参数相似度很高,序列非常保守,都含有MDH基因的特征功能域苹果酸酶NAD结合域和苹果酸酶C端功能域。亚细胞定位预测显示,SiMDH1和SiMDH2主要定位于叶绿体、细胞质和线粒体。启动子区域顺式元件分析发现,在SiMDH1和SiMDH2启动子区域含有大量光应答、激素类和其他类应答元件。苗期逆境qPCR表达谱分析发现,SiMDH1和SiMDH2受脱落酸(ABA)、聚乙二醇(PEG)、高盐和低温不同程度诱导,揭示SiMDH1和SiMDH2参与了谷子苗期非生物逆境胁迫应答。进一步分析发现,SiMDH1和SiMDH2参与了谷子在拔节、抽穗、灌浆期的干旱应答,而光照强度会显著影响SiMDH1和SiMDH2基因在不同生育期的表达。本研究为进一步分析MDH逆境应答机制以及利用基因工程方法改善作物抗逆性提供了试验和理论支持。     

甜瓜叶斑病病原鉴定及室内药剂筛选

【目的】明确近年来引起甘肃大棚甜瓜叶斑病的病原,为该病害的有效防治提供参考依据。【方法】本试验分别采用组织分离法、单孢分离法和生长速率法,对甜瓜叶斑病病原菌及其物学特性和室内药剂筛选进行了研究。【结果】将引起甜瓜叶斑病病原菌病原菌鉴定为多隔链格孢(Alternaira peponicola( Rabenhorst ) simmous)和瓜链格孢(Alternaria cucumerina(Ell.et Ev.)Elliott.)；这两种链格孢生长的最适温度为30℃、光照、适宜培养基分别为完全光照、甜瓜煎汁培养基和完全黑暗、PDA；室内药剂筛选发现不同药剂对不同病原菌抑菌率不同,其中10%苯醚甲环唑、40%氟硅唑、50%福美双、70%代森锰锌对多隔链格孢菌抑菌率均在84%以上,分别为96.66%、94.46%、90.82%、84.37%,其EC₅₀分别为17.89μg/mL、3.41μg/mL、44.27μg/mL、42.34μg/mL；50%醚菌酯、43%戊唑醇、40%腈菌唑对瓜链格孢抑菌作用较好,抑菌率均在85%以上,分别为98.20%、90.82%、85.43%,其EC₅₀分别为3.45μg/mL、21.35μg/mL、5.21μg/mL。【结论】研究结果为甜瓜叶斑病的有效防治提供了依据。     

新形势下农机购置补贴工作意见和建议

结合实际情况,对2017年农机购置补贴工作中出现的资金大量结余情况进行分析,对今后的农机购置补贴提出意见和建议。     

刍议大棚蔬菜种植技术与病虫害防治

在大棚蔬菜实际种植的过程中,需合理使用先进的种植技术方式,在生产技术的支持下,利用各类资源,科学开展栽培工作。细化管理工作内容、减少种植投资风险问题,在提升蔬菜产量与质量的情况下,提升技术水平与经济效益,确保满足当前的大棚蔬菜种植发展需求,为其后续发展夯实基础。     

野生鸟类收容救护技术探究

文章分析了进行野生鸟类收容工作需要做到的前期准备工作,并分别就野生水鸟和野生猛禽进行收容救护技术的分析,为相关单位开展野生鸟类乃至野生动物救护工作提供参考。